خصوصیات ویروس لکه حلقوی مرکبات در استان فارس

علائم بیماری لکه حلقوی شامل نقاط، خطوط، هاشورها و لکه های حلقوی سبزرد با اندازه های متنوع بر روی برگهای درختان پرتقال و لیمو ترش در تعداری از باغ های منطقه خفر (100 کیلومتری جنوب شرقی شیراز) مشاهده گردید. در اکثر درختان پرتقال دارای علائم برگی، نواحی فلسی شده خفیف بر روی پوست تنه و در تعدادی از آنها حالتهای شدید جدا شدگی و پیچ خوردگی پوست تنه و شاخه های اصلی مشاهده شد. انجام جدا شدگی و پیچ خوردگی پوست تنه و شاخه های اصلی مشاهده شد. انجام پیوند بر روی نهال های بذری نارنج و ترنج منجر به بروز علائم برگی لکه حلقوی 2-3 ماه پس از پیوند گردید. برگهای درختان پرتقال . لیموترش آلوده باغی واجدئ علائم لکه حلقوی، بعنوان بافت اولیه جهت خالص سازی مورد استفاده قرار گرفت . یک صد گرم بافت به کمک ازت مایع پودر تبدیل، با 6 حجم بافر تریس اسید کلریدریک 0/1 مولار ph حاوی 0/5 درصد دو-مرکاپتواتانول پس از 30 دقیقه عصاره گیری و انجام زلال سازی، با استفاده از دو دور peg رسوب گیری و در 4 میلی لیتر بافر حل گردید (_آموده s) در مواردی آموده s پس از رسوب با اولتراسانتریفوژ، در مقدار اندکی بافر حل شد (آموده p) از آموده s که طیف جذبی آن معرف ماهیت نوکلئوپروتئینی بود جخهت تهیه آنتی سرم استفاده گردید. آزمون نشت دو طرفه در ژل آگار حاوی sds، با آنتی سرم بدست آمده، وجود یک باند اختصاصی در مقابل چاهکهای آلوده را نشان داد. در آزمون elisa رقتهای 1/300 گاماگلوبولین متصل به آنزیم مناسب تشخیص داده شد. آزمون های diba ایمونوالکتروفورز و راکت ایمونوالکتروفورز نشانگر وجود رابطه اختصاصی آنتی بادی تهیه شده با آموده های آلوده بود. آزمون تلافین سرولوژی و الکترون میکروسکوپی با استفاده از آنتی سرمهای تهیه شده علیه جدایه های ایرانی و هندی لکه حلقوی، پیکره های رشته ای نازک و خمش پذیر جدا و به هم چسبیده ای را در آموده نیمه خالص (s) پرتقال لیمو ترش آلوده نشان داد. الکتروفورز پروتئین به روش sds-page با استفاده از آزموده های نیمه خالص (s) پرتقال و لیمو ترش آلوده، وجود دو باند پروتئینی به وزن های 19600-20600 و 33600-34400 دالتون و با استفاده از آموده های خام پرتقال و لیمو ترش باغی، پایه های ترنج و نارنج پیوندی و پیوندک پرتقال دو باند به اندازه های 18500-19500 و 30300-31900 دالتون را نشان داد. الکتروفورز نوکلئیک اسید با استفاده از آموده p نشانگر وجود یک باند به وزن 4/3x10 6 دالتون بود. تلاش جهت انتقال مکانیکی عامل مولد لکه حلقوی مرکبات به تعدادی از گیاهان علفی با و جود بکارگیری تمهیدات مختلف با موفقیت همراه نبود. نتایج آزمون زنجیره یا پلیی مراز (rt-pcr) با استفاده از آغازگرهای اختصاصی پسوروزهای a و b و لکه حلقوی و نیز آزمون های سرولوژیکی با آنتی سرم ایرانی و نمونه هایی از پسوروز و لکه حلقوی آمریکا منفی بود. انجام آزمون های بدام اندازی پیکره ها (trapping) و diba نوعی رابطه یرولوژیکی بین جدایه ایرانی و هندی را نشان داد.